edoc-Server des Robert Koch-Instituts

Veröffentlichter Artikel oder Aufsatz

Publikationsart: Veröffentlichter Artikel oder Aufsatz
Autor(en): Marwan Semaan; Daniel Ivanusic; Joachim Denner
Titel: Cytotoxic Effects during Knock Out of Multiple Porcine Endogenous Retrovirus (PERV) Sequences in the Pig Genome by Zinc Finger Nucleases (ZFN)
Erschienen in: PLoS ONE 10 (4) , 2015
S. 1-18
Verlag: Public Library of Science
Verlagshinweis: Semaan M, Ivanusic D, Denner J (2015)
Cytotoxic Effects during Knock Out of Multiple Porcine Endogenous Retrovirus (PERV) Sequences in the Pig Genome by Zinc Finger Nucleases (ZFN).
PLoS ONE 10(4): e0122059.
Verlags-URL: http://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0122059
DOI: 10.1371/journal.pone.0122059
Veröffentlichung auf edoc: 06.05.2015
Status: published
Volltext: pdf (urn:nbn:de:0257-10039421)
Schlagwörter (eng): Animals, Humans, Gene Knockout Techniques, Gene Order, Cell Line, Protein Binding, Endogenous Retroviruses/genetics, Swine, Cell Survival/genetics, Endodeoxyribonucleases/genetics, Endodeoxyribonucleases/metabolism, Gene Expression Regulation Viral, Gene Targeting, Genome, Proviruses/genetics, Zinc Fingers/genetics
Vorhaben/Arbeitsgruppe: Robert Koch-Institut, Infektionskrankheiten / Erreger
Metadatenexport: Um den gesamten Metadatensatz im Endnote- oder Bibtex-Format zu speichern, klicken Sie bitte auf den entsprechenden Link. Endnote   Bibtex  

Abstract (eng):
Xenotransplantation has been proposed as a solution to the shortage of suitable human donors for transplantation and pigs are currently favoured as donor animals. However, xenotransplantation may be associated with the transmission of zoonotic microorganisms. Whereas most porcine microorganisms representing a risk for the human recipient may be eliminated by designated pathogen free breeding, multiple copies of porcine endogenous retroviruses (PERVs) are integrated in the genome of all pigs and cannot be eliminated this way. PERVs are released as infectious particles and infect human cells. The zinc finger nuclease (ZFN) technology allows knocking out specifically cellular genes, however it was not yet used to eliminate multiple integrated proviral sequences with a strong conservation in the target sequence. To reduce the risk of horizontal PERV transmission and to knock out as many as possible proviruses, for the first time the powerful tool of the ZFN technology was used. ZFN were designed to bind specifically to sequences conserved in all known replication-competent proviruses. Expression and transport of the ZFN into the nucleus was shown by Western blot analysis, co-localisation analysis, PLA and FRET. Survival of transfected cells was analysed using fluorescent ZFN and cell counting. After transfection a strong expression of the ZFN proteins and a co-localisation of the expressed ZFN proteins were shown. However, expression of the ZFN was found to be extremely toxic for the transfected cells. The induced cytotoxicity was likely due to the specific cutting of the high copy number of the PERV proviruses, which is also commonly observed when ZFN with low specificity cleave numerous off-target sites in a genome. This is the first attempt to knock out multiple, nearly identical, genes in a cellular genome using ZFN. The attempt failed, and other strategies should be used to prevent PERV transmission.
Nutzungsbedingungen
Für Dokumente, die in elektronischer Form auf diesem Dokumentenserver bereitgestellt werden, gilt uneingeschränkt das Urheberrechtsgesetz (UrhG). Vor allem gilt, dass die Dokumente zu wissenschaftlichen Zwecken und zum Eigengebrauch zitiert, kopiert, abgespeichert, ausgedruckt und weitergegeben werden dürfen (§53 UhrG), es sei denn, dem einzelnen Dokument sind abweichende und dann allein maßgebliche Nutzungsbedingungen vorangestellt. Jede kommerzielle Nutzung der Dokumente, auch von Teilen und Auszügen, ist ohne vorherige Zustimmung des Urhebers/Autors untersagt.
Terms of use
Documents which are provided on this repository are subject to strict copyright conditions. This applies in particular to the following: the documents made available on this publication server may be cited, copied, saved, printed and passed on for scientific purposes and private use (§53 German Copyright Law), unless the individual document is preceded by deviating and then exclusively applicable terms and conditions of use. Any commercial use of the documents, even in part and excerpts, is prohibited without the prior written consent of the creator.
Zugriffsstatistik: Die Daten für die Zugriffsstatistik der einzelnen Dokumente wurden aus den durch AWSTATS aggregierten Webserver-Logs erstellt. Sie beziehen sich auf den monatlichen Zugriff auf den Volltext sowie auf die Startseite.
 
Bei Formatversionen eines Dokuments, die aus mehreren Dateien bestehen (insbesondere HTML), wird jeweils der monatlich höchste Zugriffswert auf eine der Dateien (Kapitel) des Dokuments angezeigt.
 
Um die detaillierten Zugriffszahlen zu sehen, fahren Sie bitte mit dem Mauszeiger über die einzelnen Balken des Diagramms.
Startseite: 13 ZugriffePDF: 25 ZugriffeStartseite: 2 ZugriffePDF: 16 ZugriffePDF: 17 ZugriffeStartseite: 2 ZugriffePDF: 17 ZugriffeStartseite: 3 ZugriffePDF: 35 ZugriffeStartseite: 2 ZugriffePDF: 29 ZugriffePDF: 26 ZugriffeStartseite: 2 ZugriffePDF: 22 ZugriffeStartseite: 1 ZugriffePDF: 28 ZugriffeStartseite: 3 ZugriffePDF: 55 ZugriffePDF: 52 ZugriffeStartseite: 2 ZugriffePDF: 30 ZugriffeStartseite: 3 ZugriffePDF: 28 ZugriffePDF: 31 ZugriffePDF: 33 ZugriffeStartseite: 1 ZugriffePDF: 22 ZugriffePDF: 26 ZugriffePDF: 19 ZugriffeStartseite: 3 ZugriffePDF: 20 ZugriffeStartseite: 8 ZugriffePDF: 21 ZugriffeStartseite: 2 ZugriffePDF: 19 ZugriffeStartseite: 5 ZugriffePDF: 16 Zugriffe
May
15
Jun
15
Jul
15
Aug
15
Sep
15
Oct
15
Nov
15
Dec
15
Jan
16
Feb
16
Mar
16
Apr
16
May
16
Jun
16
Jul
16
Aug
16
Sep
16
Oct
16
Nov
16
Dec
16
Jan
17
Feb
17

Gesamtzahl der Zugriffe seit May/2015:

  • Startseite – 52 (2.36 pro Monat)
  • PDF – 587 (26.68 pro Monat)
  •  

Bitte beziehen Sie sich beim Zitieren dieses Dokumentes immer auf die oben unter "Volltext" genannte URN.
Generiert am 27.03.2017, 06:50:53